Blade busca en Praga a su mentor Abraham Whistler, a quien se creía muerto tras ser atacado por Deacon Frost, pero que en cambio fue convertido en vampiro y mantenido prisionero durante dos años. Blade rescata a Whistler y lo cura. Whistler conoce a Scud, el nuevo y joven técnico de Blade.

Una pandemia está convirtiendo a los vampiros en "Reapers", criaturas mutantes y primarias con una voraz sed de sangre y una mordedura altamente infecciosa que transforma tanto a los humanos como a los vampiros. Para combatir a los Segadores, el señor de los vampiros, Eli Damaskinos, envía a su secuaz, Asad, y a su hija Nyssa a pactar una tregua con Blade, que se alía a regañadientes con los vampiros. Se alía con la Manada de Sangre, un grupo de vampiros de élite reunido originalmente para matarlo. La manada está formada por Asad, Nyssa, Reinhardt, Chupa, Snowman, Priest, Verlaine y su amante Lighthammer. Reinhardt odia a Blade y le reta a luchar, pero en respuesta Blade le implanta un explosivo en la cabeza para mantenerlo a raya.

Investigan un club nocturno de vampiros donde se encuentran con los Segadores y descubren que son inmunes a la mayoría de las debilidades de los vampiros. El líder de los Segadores, Jared Nomak, llega y mantiene a Nyssa como rehén. Intenta reclutar a Blade para su causa, citando su odio mutuo hacia los vampiros. Priest es mordido y asesinado por piedad, y Lighthammer es mordido pero oculta la mordedura. Whistler desaparece y Scud es atacado por varios Reapers, a los que ahuyenta con luces ultravioletas. Blade lucha contra Nomak, que es inmune a las armas de Blade. Cuando sale el sol, Nomak se retira y Whistler regresa, revelando que ha encontrado el nido de Reaper en la alcantarilla. Nyssa disecciona un Segador muerto y descubre que sus corazones están encerrados en un hueso resistente. Al darse cuenta de que la luz ultravioleta es su única debilidad, Scud y Whistler fabrican armas ultravioleta para el equipo, así como una bomba emisora de rayos ultravioleta lo suficientemente potente como para acabar con todo el nido.

Al entrar en el nido de Reaper, el equipo se dispersa. Lighthammer se transforma en un Reaper y mata a Snowman. Verlaine se sacrifica para matar a Lighthammer exponiendo a ambos a la luz del sol. Chupa y Reinhardt atacan a Whistler, que rocía a Chupa con una feromona de Segador. Esto atrae a una horda que mata a Chupa y Whistler escapa. Asad y Nyssa son emboscados y Asad es asesinado. Blade salva a Nyssa y utiliza la bomba ultravioleta que mata a todos los Segadores excepto a Nomak. Nyssa y Reinhardt consiguen evadir la explosión, pero Nyssa queda gravemente herida hasta que Blade le permite beber su sangre para sobrevivir.

Las fuerzas de Damaskinos traicionan y capturan a Blade, Whistler y Scud. Se revela que los Segadores existen como resultado de los esfuerzos de Damaskinos por diseñar una raza de vampiros más fuerte. Nomak, el primer Segador, es su propio hijo, al que Damaskinos considera un fracaso debido a su debilidad a la luz solar. Scud se revela como uno de los familiares de Damaskinos, pero Blade, que ya lo sospechaba, lo mata con el explosivo que colocó antes en Reinhardt. Damaskinos planea cosechar la sangre de Blade para desarrollar una inmunidad a la luz solar y crear una nueva raza de vampiros totalmente invencible. Whistler escapa de Reinhardt y libera a un Blade casi agotado, que cae en el charco de sangre de Damaskinos, restaurando su fuerza. Se abre paso entre los esbirros de Damaskinos y mata a Reinhardt.

Nomak entra en la fortaleza de Damaskinos buscando venganza contra su padre. Nyssa traiciona a Damaskinos sellando su ruta de escape hacia el helipuerto y Damaskinos es asesinado por Nomak tras fracasar en la negociación con él. Nomak muerde entonces a Nyssa, bebiendo su sangre. Blade y Nomak se enfrentan y Blade apuñala a Nomak en su único punto débil. Una vez completada su venganza, y queriendo acabar con su sufrimiento, Nomak se suicida con la espada de Blade. Cumpliendo el deseo de Nyssa de morir como vampiro, Blade la lleva al exterior y la abraza mientras su cuerpo se desintegra debido al amanecer.